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细菌学检验、病毒学检验实验课程教学大纲
2013-10-22 11:56  

 

一、本课程学时、学分、实验学时

微生物学:总学时32,学分2,实验学时:8学时

细菌学检验:总学时80,学分5,实验学时:40学时;

病毒学检验:总学时48,学分3,实验学时:20学时。

二、实验教材

细菌学检验,张朝武,2006年7月,人民卫生出版社;

病毒学检验,李洪源,2006年7月,人民卫生出版社。

三、实验的任务与目的

细菌学检验、病毒学检验为卫生检验重要的专业课程。实验教学目的是使学生掌握细菌学基本实验技术和常见病原菌及病毒的检验方法,为今后从事相关工作打下基础。

四、实验基本理论

  《细菌学检验》《病毒学检验》的基本原理及基本技能。

五、实验基本要求

根据学科发展的现状,结合实验室的具体条件,选取实验指导中有代表性的13组实验,注重培养学生的基本理论、基本操作和基本技能。

通过实验教学,要求学生进一步加深对细菌学、病毒学检验基础理论知识的理解,掌握细菌学、病毒学检验的基本技术和基本操作技能,熟悉常见病原菌、病毒的检验方法和原理,使学生建立无菌观念,掌握无菌操作技术。培养学生严谨求实的科学作风和实际工作能力。

 

六、实验项目的设置与内容摘要

序号

实验项目

计划学时

实验

类型

实验目的

主要内容

1

细菌形态学检查

4

综合性

1.了解微生物实验室规则及注意事项;

2.掌握显微镜油镜的使用和保护、细菌涂片的制备、革兰染色法的原理方法及结果判断;

3.熟悉不染色标本检查法

4.学会观察细菌的基本形态和特殊结构。

1.微生物实验室规则及注意事项;

2.显微镜油镜的使用和保护;

3.不染色标本检查:用变形杆菌悬滴法、压滴法制片、镜检观察;

4.革兰染色法:用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的混合菌液作革兰染色后镜检;

5.观察细菌的基本形态和特殊结构示教片。

2

细菌的分布与消毒灭菌,无菌器材的准备

4

验证

1.证明细菌在自然界和正常人体的广泛分布,以树立严格的消毒及无菌观念;

2.熟悉常用物理及化学消毒灭菌方法;

3.学会无菌器材的准备。

1.空气、飞沫、手指皮肤消毒前后的细菌检查;

2.热力对细菌的作用;

3.紫外线杀菌试验;

4.滤过除菌;

5.无菌器材的准备:清洗和干燥平皿、试管、吸管、三角瓶;用牛皮纸包扎平皿、试管、三角瓶;用棉纸包扎吸管后灭菌。

3

培养基制备技术

4

验证

1.掌握常用培养基制备的基本过程;

2.熟悉常用培养基的种类及用途;

3.熟悉高压蒸汽灭菌的使用;

4.了解干热灭菌器的使用。

1.介绍高压蒸汽灭菌器、超净工作台、温箱、冰箱、离心机、干烤箱等的使用;

2.参观实验室、无菌室;

3.常用培养基的制备(肉膏汤、固体、半固体培养基)。

4

细菌培养技术

4

综合

1.掌握细菌的培养方法;

2.掌握平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法;

3.熟悉接种工具、接种环境要求和无菌操作要领;

4.学会观察平板、斜面、液体、半固体培养基中细菌的生长现象。

1.常用细菌培养方法介绍;

2.平板、斜面、液体、半固体接种技术;

3.细菌培养;

4.细菌生长现象观察。

5

细菌鉴定技术

4

综合

1.掌握鉴别细菌常用生化反应的原理和结果判定;

2.熟悉鉴别细菌常用生化反应的培养基、方法和意义;

3.熟悉数字编码鉴定技术的原理和结果判断;

4.了解细菌数字编码技术操作和临床意义。

1.生化培养基的制备;

2.生化反应:糖类发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V.P试验、柠檬酸盐利用试验、KIA试验、MIU试验等;

3.介绍数字编码鉴定的原理及方法。

6

抗菌药物敏感性试验

4

综合

1.掌握纸片扩散法(K-B法)的原理、操作方法等、结果判断、意义及质量控制;

2.熟悉肉汤稀释法抗生素敏感性试验的原理、操作方法、结果判断及意义等;

3.了解稀释法的质量控制。

1.介绍常用抗菌药物敏感性试验与耐药检测方法;

2.操作:纸片扩散法;稀释法。

7

病原性球菌鉴定

4

综合

1.掌握葡萄球菌属的分离培养与鉴定方法、菌落特点、菌体形态及染色性;

2.掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法、菌落特点、菌体形态及染色性。

1.葡萄球菌属:取葡萄球菌普通琼脂平板培养物观察菌落特征及色素产生情况,取可疑葡萄球菌菌落作革兰染色、生化反应试验鉴定;

2.链球菌属:甲、乙、丙链球菌在血平板上的菌落及溶血性比较,革兰染色观察菌体形态。

8

肠杆菌科鉴定

4

综合

1.掌握常见肠道杆菌的形态、染色、培养特性、生化反应、常见类型及鉴定依据;

2.熟悉常见肠道杆菌的血清学及动物试验;

1.待检菌接种SS琼脂平板;

2.制作生化反应培养基、菌落观察、涂片、染色和镜检;

3.接种半固体-双糖铁培养基;

4.接种生化反应管、血清学反应鉴定。

9

厌氧菌鉴定

4

综合

1.掌握破伤风梭菌庖肉培养物的鉴别要点、形态染色的特点;

2.掌握产气荚膜梭菌庖肉培养物的鉴别要点、形态染色及动物实验。

1.破伤风梭菌庖肉培养物的观察及形态染色、芽胞的特点;

2.产气荚膜梭菌庖肉培养物、汹涌现象的观察、动物试验、形态染色;

3.其他厌氧细菌示教片观察。

10

革兰阳性杆菌:棒状杆菌、蜡样芽胞杆菌鉴定

4

综合

1.掌握棒状杆菌属的形态特性、染色方法、培养特性及菌落特点;

2.熟悉蜡样芽胞杆菌形态染色、菌落特点、常用生化反应及鉴定试验。

1.白喉棒状杆菌的培养特性、菌落特点及异染颗粒染色观察形态特性;

2.蜡样芽胞杆菌的形态特点、菌菌特点及乳光反应鉴定。

11

分枝杆菌鉴定;螺旋体、支原体、衣原体、立克次体形态观察

4

综合

1.掌握抗酸染色的技术要领,结核分枝杆菌菌落特点;

2.熟悉钩端螺旋体的暗视野观察技术及形态特点;

3.熟悉支原体、衣原体、立克次体形态特点、支原体的菌落特点。

1.卡介苗抗酸染色、镜检。结核杆菌在罗氏培养基上的培养物观察鉴定;

2.钩端螺旋体用暗视野显微镜观察形态及运动特点;

3.支原体、衣原体、立克次体形态观察、支原体菌落观察。

12

常见浅部、深部真菌培养和鉴定

4

综合

1.掌握真菌直接检查的制片技术及染色方法;

2.熟悉真菌菌丝和孢子形态特点及真菌的分离培养与鉴定;

3.掌握真菌的小培养方法;熟悉白色念珠菌菌落形态、菌体特征及其常规鉴定方法。

1.真菌不染色标本直接检查;曲霉和青霉的培养物、菌丝孢子观察;

2.白色念珠菌的培养与鉴定:小培养法培养,染色观察形态特征,厚膜孢子形成试验鉴定。

13

病毒的分离培养技术

8

验证

1.掌握病毒鸡胚尿囊腔接种方法,熟悉鸡胚其他三种接种方法;

2.熟悉病毒组织细胞培养方法;

3.了解病毒动物培养方法。

1.流感病毒鸡胚接种技术;

2.鸡胚单层细胞培养;

3.介绍病毒动物培养方法。

14

流感病毒的检测

8

综合

1.掌握流行性感冒病毒的分离鉴定程序;

2.熟悉血细胞凝集试验和血细胞凝集试验的操作方法及结果判断。

1.流行性感冒病毒分离鉴定程序介绍;

2.流感病毒鸡胚接种后取尿囊液作流感病毒的血凝试验,同时确定流感病毒血凝效价;

3.血凝抑制试验及确定血清抗体效价。

 

七、考核方式与评分办法

实验考核分笔试和实验操作两部分,并结合课堂表现及实验报告进行评分。成绩占考试总成绩的20%。

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